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非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

哼哼会 2021-07-02

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非洲猪瘟病毒基因组170-190kb左右,基因组大导致核酸在检测过程中容易被污染;双链的闭合的线性DNA病毒,在环境中存活时间长且核酸难被降解,自然变异速度慢。周沛副教授特别提醒即使是在现场检测到病毒阳性,也不一定是活的病毒。

5月16日下午,华南农业大学周沛副教授在南昌市的生物安全会议上分享《非洲猪瘟消杀评测》的主题报告,为到场的养猪朋友提供更科学的消毒剂评测与消毒剂测评结果。

 

一、非洲猪瘟病毒的组成

 

非洲猪瘟病毒基因组170-190kb左右,基因组大导致核酸在检测过程中容易被污染;双链的闭合的线性DNA病毒,在环境中存活时间长且核酸难被降解,自然变异速度慢。周沛副教授特别提醒即使是在现场检测到病毒阳性,也不一定是活的病毒。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟病毒基因组结构决定其的编码蛋白特别多,有151-167种编码蛋白。未知蛋白特别多,其中有34%的未知蛋白,且宿主来源蛋白多,有21个蛋白来源于宿主,以及很多的未知功能未被研究透彻。其中蛋白数量多、未知蛋白多、未知功能多以及宿主来源蛋白多的特点造成非洲瘟疫苗的研发难度很大。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟病毒的编码蛋白多形成很多的结构,由外囊膜、衣壳、双层内膜和核心壳层包裹的基因组,更好的保护其的遗传物质不被破坏,在使用消毒剂时,易出现病毒外层结构蛋白质消耗掉消毒剂,而遗传物质依旧存在的情况。病毒最外层是有外层囊膜的,其来源于宿主的,类似在外面穿件外衣及上面的抗原,便于为逃逸更好的伪装。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟病毒的颗粒大,直径约260-300纳米。粒径45-65纳米的蓝耳病毒布朗运动是比较快的,当穿过空气过滤装置时会更加容易被过滤掉。因此,猪场安装的空气过滤系统,对蓝耳病毒过滤效果较好,对非洲猪瘟病毒过滤效果可能较差。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

二、消毒剂的评测

 

消毒剂实验技术的路线应遵循科学,其过程分消毒剂和病毒的反应、中止反应以及接种细胞。看病毒还是否存活?但需要注意三大问题。

 

首先,消毒剂对细胞的影响?

 

消毒后病毒接种到细胞上能否增殖取决于病毒与细胞是否存活两个方面。如果消毒剂把细胞给灭活掉,那病毒也是不能形成增殖的。为避免假阴性的出现,消毒剂对细胞的影响一定要进行检测。残留消毒剂去除的方法包含中和剂法、过滤冲洗法和稀释法,经实践证明:稀释法会更加稳定。虽然它不是绝对的把所有消毒剂给去除掉,但却是最稳定的方法。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

其次,病毒的量与稀释倍数。在做消毒剂评测时要经过巨大的稀释,而病毒在经过稀释后,还是否呈阳性有待考究。周沛副教授建议病毒量的稀释要大于1000倍,病毒量一定要够大,才能证明评测效果。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

再次,病毒阳性对照组。一定要设立阳性对照组,而阳性对照组的选择也是有讲究的,病毒检测与消毒剂检测一样,都需要中止反应后再接种到细胞上。消毒剂的评测结果呈现是消毒组的病毒无法增殖,是空白的,而病毒的对照组能够增殖起来。最后用猪的红细胞吸附试验去验证病毒有没有增殖起来,在显微镜的观察下我们可以看到红细胞聚集到病毒粒子上。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

三、消毒剂评测结果

 

3.1.物理方式灭活非洲猪瘟病毒的评测:高温55.2℃以上即可灭活105HAD的病毒量,为猪舍内部整体加热消毒提供理论基础。暴晒40分钟以后就没有活的病毒。干燥有一定的效果但是不太好,要到第四天才能把病毒给灭活。研究侧面反应湿度高的时候,病毒是容易活下来的,而且活的时间还很长。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

3.2.化学消毒剂灭活非洲猪瘟病毒的评测:市面上绝大多数的消毒剂如季铵盐、戊二醛、过流酸氢钾等在没有有机物干扰的情况下对非洲猪瘟病毒都是有消杀效果的。其中次氯酸和二氧化氯受有机物的影响尤其严重。

 

非洲猪瘟消杀评测,为猪场科学选择消毒剂提供依据

 

3.3.消毒剂设备灭活非洲猪瘟病毒的评测:癸甲溴铵组作用30分钟可以杀灭非洲猪瘟病毒、戊二醛组作用15分钟可以杀灭非洲猪瘟病毒。

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