随着非洲猪瘟（ASF）病毒在世界范围内的持续发展，美国猪肉行业正在努力避免这种病毒进入国内。从2013年猪流行性腹泻病毒（PEDV）爆发以及关于饲料与饲料成分相关风险的开创性研究中学到的知识让我们逐步找到了更多答案。
派普斯应用研究中心主任Scott Dee, DVM, PhD在2019年美国猪兽医协会大会上说：“ASF正在到来，它来源于饲料。”
“因此我们必须要做好准备。”
早在2014年，饲料作为传播风险这一问题就引起了Dee以及南达科塔州立大学（SDSU）和堪萨斯州立大学（KSU）的研究者的关注，这主要是因为PEDV在进入美国之后的8周内就已经传播至几乎所有生产生猪的州。目前ASF即将到来，这一合作研究小组希望研究饲料是否是包括ASF病毒在内的外来动物疾病（FAD）的载体。
此研究纳入了11种病毒，包括A型塞内卡病毒（SVA）【口蹄疫（FMD）病毒的替代病毒】。由于KSU设置了生物安全研究所（一家三级生物安全实验室），他们可以直接研究ASF病毒（2007年在佐治亚州分离得到的病毒株，目前在亚洲流行）、猪瘟病毒和中国伪狂犬病病毒。
Dee说：“生猪健康信息中心（SHIC）的资金帮助我们与KSU的Niederwerder博士和她的专家团队建立了合作，这可以让我们对真实的病毒进行研究，而不是其替代品。”
合作研究组启动了一项分为三个阶段的研究，以回答以下问题：
1. 这些病毒是否可以在饲料和/或饲料成分中存活至跨太平洋或跨大西洋模拟运输？
2. 这些病毒是否可以通过被污染的饲料和/或饲料成分进行传播并且影响美国的猪群？
3. 什么工具或措施能够缓解病毒进入和发展带来的风险？
病毒能够在长途运输后保持存活
在一项使用跨国界模型模拟将饲料成分从中国运至美国的研究中，研究者发现PEDV可在一些饲料和/或饲料成分中存活至30天左右的跨洋运输结束。其他研究也已经证明ASF和SVA病毒具有相同的稳定性。
研究者检查了主要从中国进口至美国的完整饲料和饲料成分。饲料成分包括豆油饼、蒸馏后的干燥谷物和可溶物、干湿宠物食物、传统及有机大豆餐食、猪肉香肠肠衣、盐酸赖氨酸、氯化胆碱和维生素D。
堪萨斯州立大学的Megan Niederwerder, DVM, PhD发现SVA是稳定性最好的病毒，能够在进行测试的12种饲料及其成分的11种中存活，而ASF病毒能在9种成分中存活。
“考虑到SVA是FMD病毒的替代病毒，存活饲料成分占比最高的病毒在SHIC Swine Disease Matrix中被认为是最主要的病原体，”她说，“猪瘟病毒和伪狂犬病病毒能在一些饲料成分中存活，但是这些实验仍在进行。”（最近的一项研究：研究：新发现2种可在动物饲料中传播的病毒）
病毒存活存在很大变化，这取决于病毒和饲料成分的性质。研究者注意到高风险组合似乎取决于“正确病毒与正确成分的组合”。
能够在传统大豆餐食、盐酸赖氨酸、氯化胆碱、维生素D和猪肉香肠肠衣中存活的病毒更多。但是最突出的例子是传统和有机大豆餐食之间的差别，传统大豆餐食更有助于病毒存活。研究者发现一个可能的原因是相比于有机大豆餐食，传统大豆餐食含有较低的脂肪和较高的蛋白质，但是尚未形成定论。
“这一开创性研究提供的数据表明饲料成分可能是病毒在世界范围内进行移动的载体，”Dee说，“没有人做过这样的研究，这是一个全新的研究领域。”
通过饲料和液体的ASF暴露
在研究的第二阶段，开创性研究已经证实ASF病毒可通过饲料和液体传播至猪群。首席研究员Niederwerder告诉Pig Health Today此研究的目的是确定不同浓度下ASF病毒的侵染概率以及自然引水和喂养过程中口腔接触的最小和中位感染剂量。
“我们知道ASF病毒可通过野猪和家猪之间的直接接触、被污染的猪肉产品、蜱虫和用残羹喂猪的行为进行传播，”她补充说。“但是我们不知道ASF病毒是否可以通过全价植物基饲料或液体的自然消耗进行传播。”
在此研究中，单独喂养的7-8周大的猪被暴露于少量液体介质（100 ml）或全价饲料（100 g）中剂量为100 TCID50至108 TCID50的ASF病毒。饲料为不含动物基产品的玉米和大豆餐食。
在暴露后5天，对猪执行安乐死，并使用聚合酶链反应和病毒分离对ASF感染进行评估。结果表明液体中的最小感染剂量为100 TCID50，而全价饲料中的最小感染剂量为104 TCID50。液体和饲料中的中位感染剂量分别为101.0 TCID50和106.8 TCID50。
“即便在我们确信可以给予猪的最低剂量的情况下，当液体中出现病毒时，大约40%的猪会被感染，”Niederwerder说。“从急性感染的猪身上脱落的病毒通常在此范围内，甚至更高。”
研究人员还通过液体和饲料的典型消耗模式模拟了实际中可能出现的重复暴露情况。他们发现在所有ASF病毒剂量水平下，感染可能性都随着接触次数的增加而增加。这一点很重要，因为猪会重复消耗受污染的饲料或液体，这取决于它们的年龄，并且其消耗量（分别为> 100 g和> 100 ml）高于进行研究的消耗量。
“例如当病毒浓度为104 TCID50 virus时，一次暴露之后的感染可能性为25%，而10次暴露之后，感染可能性接近100%。”Niederwerder注意到。即使是在液体具有较低的最小感染剂量的情况下，饲料似乎更令人担忧，这是因为“一批受到污染的饲料可能被分发给多个农场，可以提供好几天的饲料，并且为很多猪提供食物。”
尽管现在我们已经知道ASF病毒可以在饲料和/或液体成分中存活30天以上，我们正在研究其感染能力可以维持多久。“我们需要考虑饲料是ASF病毒进入美国猪群的方法之一，”Niederwerder说，“但是这不是唯一一种方法，我们需要随时关注并采取预防程序来保护美国猪群。”
缓解措施是下一个优先考虑的事项
风险缓解是研究的第3阶段。这包括建立ASF病毒的半衰期数据集用于优化饲料处理的保存建议并减少传播风险。需要注意的是猪肉产业集群根据目前的知识给出了有关保存时间的建议。
Niederwerder说：“我们知道在肉类和其他基质中，病毒容易受到高温的影响，因此我们应针对饲料成分控制保存时间和温度，以保持病毒处于未激活状态。”
目前生产者和饲料生产商可以开始从ASF病毒风险较低的国家中进口饲料成分，同时考虑是否可以更换或去除某些成分。此外，猪肉产业集群向生产者提供了饲料成分决策树以帮助生产者与饲料供应商进行合作，最小化饲料成分带来的风险。
重视饲料风险
根据在中国的工作经历，Dee认为生产者非常重视饲料风险。例如他发现生产者每天对250个样本进行检测，并且建立了包括11000多个样本的数据集。“在这些样本中，他们发现了少量阳性样本，1%至2%的ASF病毒存在于全价饲料和饲料成分中，”他说，“这说明你需要非常努力才能发现这种病毒。”
更令人惊讶的是他们发现的环境污染。Dee继续说：“他们在磨坊、卡车、人身上和鞋上发现了ASF病毒，就像核弹一样。什么东西都被乌云所覆盖。”
化学缓和剂可能是一种选择，Dee和南达科塔州立大学的研究人员Diego Diel, DVM, PhD正在进行关于其他病毒的研究。他们正在派普斯通兽医服务的设施中进行此研究，他们将100头猪分为6组，每组单独在一个房间中进行饲养。每个房间都有独立的容器，以确保将受到病毒感染的饲料和未受到病毒感染的饲料分开。他们已经对10多个公司的多种候选产品进行了检测。
Dee解释说他们尽可能使病毒暴露过程贴近自然。在1磅重的冰块中接种SVA、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSv）和PED病毒（100 ml，105），然后将其放入饲料容器，让其融化并渗入饲料中。他们用棉签对整个环境进行采样，以确定病毒是否通过饲料进入了整个房间，并且对猪进行了体液检测和尸检。
初步结果对PRRS和SVA病毒比较有利，但是PEDV的结果不太理想。“所有产品都能很好地缓解病毒带来的风险，”Dee说。“它们能够降低病毒载量和感染风险，但是仍然没有一个很好的方法。”
他们计划在年底之前对10种其他缓和剂进行研究。之后Dee和Diel会把相关信息交给Niederwerder进行ASF病毒检测。
“我一直把2019年视为缓和剂发展的关键之年，”Dee说。“生产者相信饲料中存在风险，而且不想让ASF或其他FAD有机会进入猪群。他们正在利用科学知识作出决定，而我们正在努力向前，接受即将出现的挑战。”
防非复养：
饲料是最直接可以接触到猪的传染源，原料的采购、饲料高温制粒、运输安全都是我们需要考虑的问题。
病毒感染需要一定的量，这也是为什么我们发病后往往不知道传入的途径，可能是某一次带毒也可能是多次微量带毒，也可能是多次错误的做法都没有感染，一次大剂量才导致发病。
