猪场在发生非洲猪瘟以后会采取“拔牙”式清除让猪群尽快稳定下来,拔牙是将阳性个体或群体从可能还未感染猪群中安全清除的方式,其关键是要做到早期诊断,否则一旦猪场呈现“多点式”发病,想要取得拔牙成功会增加难度,也会让猪场遭受巨大的经济损失。
实验结果显示,非洲猪瘟在自然感染情况下病毒最早出现在唾液中,较血液中出现病毒载量早3-4天,因此唾液检测已然成为精准拔牙的重要手段。那么如何做好唾液的采集与储存,供以养猪从业者参考。
1. 唾液样品采集的方法
第一步,取出样品采集袋,并放入样品采集袋置于栏内猪只容易接触到的地方,样品采集袋与采样猪只肩部同高,不可放在容易被污染的如猪只饮水或拉粪尿的区域,防止样品在采集过程中被直接污染。
第二步,待样品采集袋被猪只的唾液充分浸润后,然后将唾液挤出到样品收集袋内,对取样后的样品采集袋进行归集,做焚烧等的无害化处理,防止其在场区内成为新的疫病传染源。
第三步,将唾液挤出转移到样品收集管内,需要注意的是每个样品至少2ml,取样量太少不利于实验室检测的实施。
第四步,在唾液收集的过程中如果遇到杂质,如饲料、食物残渣等,必要的时候需要做好离心,2000g的离心力,进行10分钟的时间。
第五步,样品收集管要要特别注明取样猪场名称,取样栋舍以及取样日期,对之后采取精准拔牙有着至关重要的作用(唾液样品可以混合,但不宜超过5个样品,过多会影响检测的准确度)。
2. 唾液样品的保存
对采集的唾液样品在送往实验室前需要保存在冰箱内,必须在24小时内送往实验室进行检测。如果不能或是要用作后期的复检,则应将样品保存于-20至-80℃冷冻保存,并且加入核酸保护液。
3. 唾液样品采集的几点注意事项
1)对计划采集唾液样本的猪群在前晚停料不停水,间隔10-12小时采集唾液,保证唾液里面没有食物残渣,确保检测结果不受影响。
2)对母猪或公猪可以单头采集唾液,保育仔猪或育肥猪可以采集群体唾液。
3)采集完唾液,将唾液与核酸保护液按1:1,马上挤到含核酸保护液的瓶中(唾液中的酶对病毒有降解作用),之后采用冰袋运至实验室。
4)如果直接送至实验室可以2~8℃保存,用于长期之后的复检,需要-20至-80℃保存。
小结
“拔牙”式清除是非瘟防控与快速稳定猪群卓有成效的手段,想要做到精准拔牙有赖于唾液检测的早期诊断,唾液样品的采集与储存要精心设计,以确保检测的准确性。在样品采集时要注意样品被污染的风险,对参与样品采集的样品采集袋、样品收集袋等做好无害化处理以减少可能成为场区内新的传染源。同时对拔牙后幸存的猪只采取必要的措施干预,以防止再次的发病,在饲料中持续添加中药制剂康之源4kg/t维持猪群的持续稳定,并加快猪群的快速转阴。