疥螨感染想要确诊并不容易,因为大多数感染猪只都处于亚临床感染状态,皮肤病变通常较难辨认。
一般情况下,当猪的皮肤出现较多小而红的斑点并逐渐增厚时,通常表明可能存在皮肤病问题。
本文对猪疥螨的一般诊断方法进行了综述。
01 眼观评估法
在屠宰过程中,检查猪的皮肤,看是否有小而红的斑点。感染猪通常表现为2级或3级病变。下表是屠宰场进行检查时,用到了皮肤病变评分系统:
表1.疥螨在猪皮肤上的分布位置及感染程度
02 寄生虫学检查
肉眼观察
在皮肤病变部位,尤其是耳朵内部,有可能观察到疥螨的存在。可以使用一个茶匙在耳廓内刮取疑似组织,并涂在黑纸上,停留10分钟。
疥螨呈圆形,长0.5毫米,有可能通过肉眼观察到。
低倍显微镜观察
为了更好地识别疥螨,刮取的材料应该提交到实验室进行显微镜检查,收集的材料放在一个培养皿中,在30℃下培养至少8小时,并在低倍显微镜下进行检查。
沉淀法
使用10%氢氧化钾浸泡刮取的材料,然后对溶液进行离心,在沉淀物中检查是否存在疥螨。
漂浮法
使用10%氢氧化钾浸泡刮取的材料,然后用漂浮法检查是否存在卵、幼虫和成虫。
两种方法的检出率对比
使用漂浮法比观察法效果更好。Alonso de Vega等人在1998年使用漂浮法确诊了37%的阳性猪,而使用观察法仅确诊出25.56%。无论采用何种刮取材料的方法,用于刮取的工具都是非常重要的。
由于猪只毛发粗硬,皮肤污垢较多,不建议采取浅层刮取,进行刮取时需要刮到渗血为止。
与其他皮肤病的临床特征对比
疥螨可能会与正常的死皮(过度角化)混淆(见下图2),这种皮屑通常出现在背部和颈部。然而,疥螨造成的痂可以穿透皮肤表面,不容易去除,且皮肤损伤明显。
其他可能混淆的猪病或损伤还有油皮病、猪痘和晒伤。
图2.过度角化
在无疥螨的猪群中,有时耳朵刮取物会出现螨虫卵和螨虫,但不会出现临床症状。几乎很难区分这种螨与猪疥螨。
特别是如果猪睡在旧草料上,因为这些草料可能已经被其他动物(如老鼠或鸟类,自身携带寄生虫)污染过。
这类螨虫不会在猪身上生存很久,也不会引起疾病。
03 血清诊断法
红细胞间接凝集试验
检测感染猪的血清抗体是另一种诊断方法。早期使用的被动血凝试验用于检测患有疥螨感染猪的血清抗体,使用着色的牛红细胞。在实验动物中,检测到的抗体滴度为1:40至1:160。
ELISA检测
现在也较多使用ELISA技术来检测疥螨抗体。
通过血清学方法,对猪群中的疥螨感染状况进行常规监测。为了检测存在疥螨感染的猪的抗体,1997年,Bornstein和Wallgren进行了一次ELISA实验,结果显示试验的敏感性和特异性分别为87.8%和99.5%。如果以表皮刮取物为金标准,数据则显示出更高的敏感性(100%)和较低的特异性(32.8%)。
Bornstein和Zakrisson,Wallgren和Bornstein分别在1993年和1997年,通过从疥螨提取物中制备抗原,成功用于确认猪群是否不存在疥螨感染的抗体检测。
2003年Kessler等人使用间接ELISA法,检测针对疥螨感染和经过治疗的猪只抗体,并认为在实施监测和净化时,应同时考虑血清学技术的敏感性。需要注意的是,因为母源抗体水平可能持续一年之久,因此至少等待12周后才对这个阶段的断奶仔猪进行检测。
04 分子诊断技术
现在PCR实验被用于不同动物中各种寄生虫感染的诊断,对于疥螨的研究还在进行当中。
2009年,Alasaad等人在发表文章中提到了提取DNA的方法。之后的几年, Sarcoptes-WMN也致力于利用PCR进行疥螨的免疫学诊断和分子学诊断。
PCR技术检测疥螨,有什么注意事项吗?