这是本系列第二篇关于卡车清洗消毒的评估介绍了如何开展和评估微生物学验证和三磷酸腺苷检测的结果。
在视觉评估（在本系列有关动物运输中的生物安全性的系列文章的前一篇文章《运输车辆洗消后的目测评价很重要》中讨论过）之后，我们继续对该过程进行微生物学评估。
微生物评估
该系统用于评估车辆的清洗和消毒程序，但不可用于评估装载前卡车的状况；主要问题是获取信息所需的时间（样本培养，在48-72小时内才能出结果）。那时，卡车肯定已交付了货物。
在微生物学验证中，主要目的是检测肠道细菌（革兰氏阴性菌是肠道微生物群的一部分）。这些肠杆菌会在清洗和消毒车辆后指示是否存在有机物。此方法代替了针对猪病原体（PRRS，PED等）的特异性PCR，因为该PCR仅指示遗传物质的存在，但如果病原体是活的并且能够感染，则不会指示。
对于运输车辆的微生物检查，标准化采样非常重要（应始终以相同的方式进行）。可以使用棉签或RODAC®板来完成采样，但由于拖车的表面积很大，最好使用特殊的湿巾或海绵（雪纺布®/Sodi box®）来增加取样的表面积（照片1）。
通常从每个拖车地板采集两个样本（2），从车尾升降台采集一个样本（1），从驾驶室采集一个样本（1），从车侧面采集一个样本（照片2）。这意味着每辆车采集7到9个样本（取决于卡车的甲板数量）。每个采样点的表面积必须相同（cm²），并且必须将该采样面积大小报告给实验室，以便最终以CFU/cm²的形式给出结果。
照片1：棉签，雪纺布和海绵。
照片2：采样点
微生物培养结果评估：没有正确的肠杆菌浓度可以认为运输工具“适合”或“不适合”运输动物。但是，对于食品行业，有一些参考值：如果该区域的肠细菌数量为0-10个/平方厘米，则认为其“适合”。根据这一参考值，每个公司都必须确定自己可接受的分界点。
三磷酸腺苷（ATP）的检测
由于受微生物培养所需时间的限制，市场上还有其他方法可用于验证清洗和消毒效果，这些方法同样来自食品行业，可将其与微生物学结合来验证生猪运输车辆的清洗和消毒效果。其中较普遍采用的一个方法是检测三磷酸腺苷（ATP）。
ATP是一种存在于粪便、有机残留物、食物、细菌、原生动物、寄生虫、酵母和真菌中的成分。然而，它不能检测病毒的存在。在食品行业中，工作台表面的ATP检测被用作清洗和消毒的质量控制。这是一种快速的测试（可在十几秒内得到结果），易于工人使用，但由于该测试非常敏感，因此在解释结果时必须格外谨慎。
在上述控制点采集运输车辆样本（照片2），使用已包含润湿剂和荧光素酶（被ATP激活）的拭子。每个控制点采样面积为10厘米 X 10厘米（100平方厘米）。使用光度计（照片3）读取拭子的生物发光，并获得RLU（相对光单位）结果。
照片3：用于ATP检测的光度计和棉签拭子示例。
ATP结果评估：与微生物测试一样，必须确定临界限值，以告诉我们哪些值可以被认为是合适的。在食品行业中，这些值可能因取样的表面积和生产的产品而不同。在加拿大的一项研究中，评估了使用ATP生物发光法对生猪运输车辆清洗和消毒方案的有效性，并确定了以下临界值：430 RLU/100厘米²以下适用；污染风险在430和850 RLU/100 厘米²之间；以及在850 RLU/100厘米²以上的高风险（这些值只是示例）。
在评估结果时，应在清洗和消毒后在清洗的设施中取样，因为如上所述，这是一种非常敏感的方法，环境污染会增加阳性值。
用于ATP检测的光度计是一个初期投资，但每个样本的成本并不高（约2欧元/拭子）。建议重新校准读数装置（可通过擦拭无菌注射器或无菌“vacutainer®”管的内部来获取校准样品）。
养猪业越来越意识到，我们必须在猪场和动物运输中严格执行各种规程，并且这些规程必须是书面的。但有时我们忘记了最后也是最重要的步骤，即验证方案，以了解其是否真正有效，或者换句话说，质量控制永远要与时俱进！
