猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED),是目前养猪业中仔猪的“头号杀手”,造成巨大的经济损失。PED在我国流行已久,疫苗免疫是常见的应对措施,但效果不尽如意。自2013年美国发生PED疫情爆发后,当地兽医学者采用PED野毒驯化的方式,取得良好效果。目前,在我国后备母猪进行野毒驯化,对繁殖场PED防控取得积极的影响。然而在繁殖场进行全群返饲则往往面临更大的损失。纠其原因可能是妊娠阶段母猪感染PEDv所产后代仍会发病以及分娩母猪排毒有关,为此美国进行了相关的临床研究,本文予以分享讨论。
1. 试验分组设计
试验分为四组,第1组为妊娠早期组,10头妊娠19-22天母猪;第2组为妊娠中期组,7头妊娠57-59天母猪;第3组为妊娠后期组,6头妊娠82-95天母猪;第4组为阴性对照组,4头妊娠82-95天母猪。各组母猪在接种PEDv前进行肛拭子检测,确定未感染PEDv后进行接种PED野毒,对照组不接种(见下图1)。
2. 监测指标
1) 临床指标:
各组所产仔猪在攻毒后分别记录各组仔猪成活率、日增重、排毒情况、以及粪便评分。
2) 实验室指标:
各组母猪在分娩后采集初乳(0-12h以内),3-5天常乳、8-14天常乳、15-22天常乳以及22-34天常乳;仔猪在3-5日龄开始进行攻毒。各乳汁样品分别检测IgA、IgG抗体、抗体分泌细胞ASCs以及中和抗体(VN)。
3. 试验结果
1) 临床表现结果:
在攻毒后,妊娠中期母猪(第2组)所产仔猪表现出完全的保护,仔猪成活达率100%,日增重最高,同时排毒量最小,持续时间也更短。该组仔猪粪便接近于正常;妊娠早期组也获得较高的临床保护率,仔猪成活率达87.2%,但长速受到一定程度的影响;而妊娠后期母猪(第3组)所产仔猪则部分保护,仔猪成活率仅55.9%。同时生长受到明显阻滞,有腹泻表现(见图2)。
图2 仔猪攻毒后临床表现
2) 抗体检测结果:
妊娠中期组母猪(第2组),乳汁IgA和IgG抗体分泌细胞(ASCs)明显高于高于妊娠后期母猪组(第3组),同时也高于妊娠前期组(第1组),在检测出的抗体情况也一致,乳汁IgA、IgG以及中和抗体,均是妊娠中期组最佳、妊娠前期组次之而妊娠后期组最差(见下图3)。
图3 各组母猪乳汁抗体分泌细胞和抗体含量检测结果
3) 腹泻与乳汁抗体相关性结果:
通过将各组检测的抗体数据与仔猪成活率数据进行皮尔逊相关系数检验(r值和p值)。仔猪攻毒成活率与乳汁IgA抗体、IgA抗体分泌细胞、IgG抗体分泌细胞以及中和抗体呈相关性,与IgG抗体无相关性(见下表1)。
表1 仔猪成活率与乳汁抗体相关性分析
4. 讨论
一直以来PED防控是养猪业的关注焦点,PEDv经猪肠道刺激粘膜免疫,激活肠-乳腺轴,乳腺分泌抗体实现对仔猪的被动免疫保护是PED防控的基本原理。在活疫苗难以有效激活肠道免疫的背景下,如何在妊娠阶段通过PED野毒感染,实现对仔猪的被动免疫保护是当下养猪业急需解决的难题。在本文中,首次在妊娠前、中以及后期母猪感染PEDv,以观察后代仔猪的被动免疫保护情况。结果发现妊娠后期母猪感染PEDv后,难以形成对后代仔猪的被动免疫保护。这可存在两点原因:首先与妊娠后期胎体形成后,母体会削弱免疫反应以防止对胎儿的免疫排斥,其次还与妊娠后期感染PEDv后会存在母猪排毒不净,分娩时仍会排毒导致仔猪感染。这也是繁殖场发生PED疫情后,贸然进行全群返饲面临较大损失可能的原因。
总结
1. 妊娠前、中期母猪感染PEDv后,后代仔猪能获得良好的被动免疫保护
2. 妊娠后期母猪感染PEDv后,后代仔猪无法获得被动免疫保护,同时仔猪可能会发病
3. 仔猪PED攻毒后成活率与乳汁IgA抗体以及中和抗体显著相关
4. 腹泻灭活疫苗能产生效果与免疫后促进乳腺分泌大量的IgG抗体分泌细胞相关
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