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黏膜免疫是局部黏膜组织在病原的刺激下诱导出的免疫应答反应，是动物机体免疫系统的重要组成部分，主要包括肠道黏膜免疫和呼吸道黏膜免疫。在动物机体疫病防控中起到生理屏障功能。
01 黏膜免疫的特点
黏膜组织是大部分病原微生物攻击机体的门户，黏膜免疫可在呼吸道黏膜表面诱导产生肌内注射疫苗难以产生的呼吸道黏膜免疫保护，将外来病原微生物在侵入机体组织之前消灭，不至于对机体组织造成损伤。黏膜免疫的免疫活动和黏膜本身的物理屏障共同构筑机体御病的“第一道防线”。同时黏膜免疫不需要注射接种，可以避免因肌肉注射带来的局部不良反应。
02 黏膜免疫在猪伪狂犬病防控中的应用
黏膜免疫主要应用于猪群呼吸道和消化道疾病的防控，对应的免疫途径为喷鼻型和口服型等。呼吸道黏膜免疫系统在控制和清除呼吸系统病原体感染过程中发挥着关键的作用。
猪伪狂犬病毒主要是通过空气和鼻腔接触传播，野毒感染后在上呼吸道的上皮细胞内复制增殖，入侵扁桃体和肺以及三叉神经，最后遍布全身及神经中枢，造成各种病理症状。
猪伪狂犬病防控的困惑是母源抗体和一般的免疫（肌注）只能在一定程度上限制野毒的复制，并不能制止野毒的入侵。黏膜免疫可以使用活疫苗刺激呼吸道黏膜免疫系统，促使疫苗毒株进入神经细胞，做到“占位效应”，从而抵抗野毒的感染入侵。目前猪场多采用1-3日龄仔猪喷鼻免疫的方式激发黏膜免疫，为猪伪狂犬病净化打下坚实基础。李爱荣等实验显示，免疫时机、疫苗剂量对黏膜免疫效果影响很大，同样的疫苗在仔猪出生当日使用喷鼻免疫效果最佳（见表1）。朱连德等实验表明不同的疫苗喷鼻效果有差异。使用喷鼻器可以将疫苗雾化的形式分散，增加吸收面积，可确保充分吸收，效果优于注射器滴鼻。
表1.李爱荣喷鼻超免实验数据
备注：每只鼻孔0.5ml剂量浓度为1头份/ml,稀释方式为10ml稀释液稀释10头份/瓶疫苗；每只鼻孔0.2ml剂量浓度为2.5头份/ml,稀释方式为4ml稀释液稀释10头份/瓶疫苗。
03 猪伪狂犬病弱毒疫苗的种类
国内猪伪狂犬病弱毒疫苗均为gE基因缺失疫苗，分为自然缺失和人工缺失两种，其中TK基因是否缺失有重要的区别。研究表明，TK基因对伪狂犬病毒在神经组织细胞中的增殖、复制以及保持长期潜伏感染和潜伏感染状态病毒的复活起关键性的作用。TK基因的缺失引起PRV在神经组织中的复制能力大大减弱。缺失TK基因的弱毒苗在三叉神经节的移植能力几乎没有。姜辰龙等实验表明TK／gI／gE基因缺失可有效减低病毒对神经细胞侵染力，但中枢神经系统仍存在隐性感染（见表2）。猪伪狂犬弱毒疫苗保留了TK蛋白对应的基因，有助于疫苗株三叉神经占位，避免野毒持续反复感染，用于1-3日龄的喷鼻免疫，有利于伪狂犬的净化，使用保留Tk基因的伪狂犬疫苗进行鼻内接种的免疫效果更佳。
表2.伪狂犬病毒主要基因功能
04 猪伪狂犬病耐热保护剂活疫苗（C株）滴鼻“占位效应”试验
试验方案：
赖志在某猪伪狂犬阴性猪场选初生仔猪5窝，10头/窝，共计5组，实验分组见表3。仔猪出生后第二天上午滴鼻。滴鼻免疫后，5头猪剖检取脑神经组织通过免疫荧光定量技术检测脑组织病毒含量，通过免疫组化方法评估猪伪狂犬活疫苗C株的脑神经占位效应。另外5头观察仔猪临床症状，至保育结束。
表3.滴鼻“占位效应”试验设计
试验结果：
(1) 不同分组脑组织病毒含量（TCID50）结果
图1.脑组织病毒含量检测结果
结果（图1）显示：脑组织病毒含量平均值最高为A组、其次是B组，说明含TK基因的伪狂犬疫苗毒株C株，占位效应优于TK-缺失的疫苗毒株。用AD04佐剂稀释液滴鼻的占位效应优于普通稀释液。
(2) 不同分组脑组织免疫组化结果
图2.脑组织免疫组化结果
结果（图2）表明：含TK基因的伪狂犬疫苗毒株C株占位效应优于TK基因缺失的毒株。综合来看，滴鼻免疫对比试验结果表明，猪伪狂犬病疫苗毒株TK基因的存在有助于病毒占位。猪伪狂犬病毒C株占位能力优于TK基因缺失毒株，占位效应更强。
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