近年我国猪群感染猪流行性腹泻相当普遍,2018年1月中旬,我国腹泻疫情更是屡屡发生,造成巨大的经济损失。
面对近年来的腹泻疫情,在临床生产实践中一些经典的腹泻疫苗不能很好地抵抗疾病,饲养者们可通过选择合适的疫苗进行科学的免疫防疫,才是科学有效的防控手段。当怀孕母猪产生免疫并通过母源抗体,保护其后代,可停止发生(10版猪病学)。
新手段:产前母猪免疫和加强免疫灭活疫苗能抑制母猪排毒、治疗腹泻
通过疫苗防控病毒性腹泻,已经是公认的最好的防御措施,但活疫苗和灭活疫苗的免疫效果如何,疫苗如何组合免疫效果更好,韩国研究人员做了相关的实验。
本研究使用的活疫苗和灭活疫苗均来自韩国,20头配种母猪随机分成4组,每组5头。4组分别为非免疫阴性组、灭活苗免疫组和灭活疫苗加强组(K/K)、活疫苗免疫组和活疫苗加强组(L/L)、活疫苗免疫组和灭活疫苗加强组(L/K)。根据标准疫苗免疫指导方针进行免疫PEDV疫苗。母猪免疫两次,分娩前4周和前2周各免疫一次。疫苗进行肌肉注射免疫。血清和初乳的ELISA检测、血清中和试验根据标准方法进行。结果表明,母猪血清样品中,K/K组有较高的IgG抗体滴度,比L/L组或L/K组高2倍,母猪血清中的IgG可以保护母猪不受PEDV感染;初乳样品中,K/K组的SIgA水平最高,母乳中的SIgA抗体滴度高,为哺乳仔猪对抗PEDV提供了保护力;三组仔猪血清的SIgA滴度,K/K组的SIgA水平最高(下图)。
血清中和滴度。L/L、L/K或K/K免疫的母猪血清、初乳和仔猪血清进行中和试验评估抗体的潜在保护力。
血清中和抗体是疫苗效力最重要的因素。K/K免疫组母猪和仔猪具最有效的中和抗体,尤其体现在初乳中。这个发现非常重要,因为关乎到PEDV疫苗接种策略,PEDV主要依靠被动免疫获得有效的保护性抗体,哺乳仔猪在摄取母猪初乳时获得SIgA而获得对PEDV的抵抗力。母猪血清中的IgG可以保护母猪不受PEDV感染,另外,据报道,美国的一项研究表明,给产前母猪免疫灭活疫苗可以激起母猪对PEDV的免疫回忆应答,激发母猪肠道粘膜分泌SIgA(随后激发肠道乳腺链接,从而诱导催乳免疫,乳腺分泌SIgA),肠道粘膜SIgA可聚集潜在和入侵的PEDV,使之易于通过蠕动纤毛运动和粘液将其清除,以保护肠道屏障的完整,让母猪减少PEDV排毒或不排毒,从而减少对仔猪PEDV的垂直传播。
尽管,PED疫苗的效力普遍还存在争议,目前的研究表明,给产前母猪免疫和加强免疫灭活疫苗能够刺激母猪产生较高水平的IgG和SIgA抗体滴度。K/K组能为母猪和仔猪提供最有效的中和抗体。中岸生物泻芷优比目前市场上同类产品的抗原含量高10-100倍,产前泻芷优+泻芷优免疫程序是预防PEDV的最好选择。
对比试验:泻芷优在被动免疫和主动免疫均优于竞品
泻芷优具有:优选优化疫苗毒株,经过蚀斑克隆纯化,免疫原性好;高抗原含量,灭活前每毫升病毒含量不低于107.0TCID50;高交叉保护力,可抵抗G2a、G2b亚型强毒株攻击等优势和特点。以下是泻芷优与竞品在被动免疫和主动免疫对比试验数据:
被动免疫与竞品的比较(PED)
主动免疫与竞品的比较(PED)
被动免疫与竞品的比较(TGE)
主动免疫与竞品的比较(TGE)
通过分级微滤与分级超滤的纯化工艺,大大减少了半成品毒液中的大分子与小分子杂蛋白的干扰,疫苗安全性更好,免疫效果更佳。
用实时荧光定量PCR进行病毒拷贝数的测定,与竞品比差异显著,一般疫苗是28-10,泻芷优可以达到212。
泻芷优常规免疫二免后14天腹泻中和抗体不低于1:32,28天腹泻中和抗体不低于1:64,胃肠炎中和抗体不低于1:32。
腹泻二联苗的效力检验-qPCR
相同抗原效价的条件下,泻芷优所含的病毒拷贝数更多,有效抗原含量更高。泻芷优腹泻病毒拷贝数为1010/ml,比市场竞品(市场竞品病毒拷贝数为(108-109/ml)。高10-100倍。
采用后海穴注射最有效
猪后海穴位于畜禽尾根与肛门间凹陷处。大量试验结果表明后海穴注射同时发挥了经络腧穴的传导治疗作用和传统给药途径的药理治疗作用,使疫苗作用的速度和强度超过同等剂量下的肌肉注射。
而且已经有不少试验结果表明后海穴对疫苗的放大作用与免疫功能密切相关。
通过猪后海穴注射与常规口服、肌肉注射3种途径免疫猪传染性胃肠炎和流行性腹泻二联疫苗,结果表明母猪初乳、常乳及免疫仔猪血清中IL-2的含量以穴位免疫最高。IL-2是一种白介素,是免疫系统中的一类细胞生长因子,能调控免疫系统中白血球的细胞活性,也参与抗体反应。
1、IL-2可刺激T细胞产生多种淋巴因子。
2、IL-2直接作用于B细胞,促进其增殖、分化和IgG分泌。
3、IL-2可活化巨噬细胞。
4、IL-2对某些因细胞免疫功能低下而受病毒感染,需增强细胞免疫功能的动物有一定疗效。
5、IL-2可通过增强CTL(一种特异T细胞)活性,分泌各种细胞因子参与免疫作用,对病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒免疫的重要防线。
6、IL-2可同时增强NK(自然杀伤细胞,是机体重要的免疫细胞,与抗病毒感染和免疫调节有关)活性以及诱导干扰素产生而介导抗病毒感染的。
7、IL-2可提高机体保护性免疫应答的水平。
建议免疫程序
用优选优化的PEDV疫苗株制备的灭活疫苗(泻芷优)有比较理想的保护力,推荐免疫程序:
1、后备母猪:
配种前后海穴注射免疫三次泻芷优,每次2毫升/头猪;
2、经产母猪:
经产母猪断奶后6~7周、产前4~6周、产前2~4周各后海穴或肌肉注射一次灭活疫苗(湖南中岸-泻芷优)
发病防控策略
1、尽快确诊:
PEDV、TGEV、PRoV,或混合感染(临床症状、剖检、实验室诊断)
2、隔离措施:
病畜的隔离,腹泻不足4周的妊娠母猪,单独饲养在隔离产房,避免病毒进入分娩单元。
3、应用消毒剂彻底消毒:
圈舍(20%福尔马林熏蒸,3%氢氧化钠喷洒),运输工具(戊二醛、双链季铵盐)等。
建议全群母猪紧急后海穴注射泻芷优,2头份/头母猪;二周后再普免一次,后海穴注射泻芷优,2头份/头母猪。
结语
多年来,中岸生物对PED疫苗的研发工作一直没有停滞。筛选和培育出具有良好免疫原性、高抗原效价的毒株是疫苗研制成功的关键。动物机体抗感染免疫的过程中,体液免疫和细胞免疫都非常重要。目前,基于腹泻疫情发生形势的变化,结合现有腹泻疫苗研究概况,我们认为今后对猪流行性腹泻疫苗的研发可以从以下方面加以重视:
1、猪流行性腹泻近几年有新变化,研究人员可以长期监测腹泻疫情的发生,加快科技转化为生产力的进度,加快实验室研发转化为生产的速度,使养猪业受惠。
2、有针对性地考虑加强联苗的研发。持续追踪调查,检测和分离临床上与PEDV共感染的其他肠病毒,作为多联疫苗毒株的候选。
湖南中岸生物本着坚定走“至臻品质、止于未知”的精品路线,以尊重并服务中国养猪业为目标,经过充分的市场调研,公司研发部潜心研究,用优选优化的PEDV疫苗株制备高抗原含量的流行性腹泻和传染性胃肠炎二联灭活疫苗(泻芷优),经田间试验对我国现流行的PEDV有非常好的保护力,可以对我国现流行的PEDV引发的PED进行有效的控制。